Hur fungerar Sanger DNA -sekvensering?
Hur fungerar Sanger DNA -sekvensering?

Video: Hur fungerar Sanger DNA -sekvensering?

Video: Hur fungerar Sanger DNA -sekvensering?
Video: DNA Sequencing - 3D 2024, November
Anonim

Sanger -sekvensering resulterar i bildningen av förlängningsprodukter av olika längder som avslutas med dideoxinukleotider vid 3'-änden. Förlängningsprodukterna separeras sedan genom kapillärelektrofores eller CE. Molekylerna injiceras med en elektrisk ström i en lång glaskapillär fylld med en gelpolymer.

På detta sätt, vad är Sanger -metoden för DNA -sekvensering?

Sanger-sekvensering , även känd som kedjeavslutning metod , är en teknik för DNA-sekvensering baserat på den selektiva inkorporeringen av kedjeterminerande dideoxinukleotider (ddNTP) av DNA polymeras under in vitro DNA replikering. Det utvecklades av Frederick Sanger och kollegor 1977.

Dessutom, hur fungerar kedjeavslutningssekvensering? Sanger DNA sekvensering är också känd som kedja - uppsägning metod av sekvensering . ddNTPs resulterar i uppsägning av DNA-strängen eftersom ddNTP saknar 3'-OH-gruppen som krävs för fosfodiesterbindningsbildning mellan nukleotider. Utan denna bindning, den kedja av nukleotider som bildas är avslutas.

Helt enkelt, varför gör vi Sanger -sekvensering?

Sanger-sekvensering är a metod av DNA -sekvensering baserat på den selektiva inkorporeringen av kedjeterminerande dideoxinukleotider av DNA polymeras under in vitro DNA replikering. Den har fortfarande fördelen jämfört med kortläsning sekvensering teknik (som Illumina) att det burk producera DNA -sekvens läser av> 500 nukleotider.

Är Sanger-sekvenseringen korrekt?

Sanger-sekvensering med 99,99% noggrannhet är "guldstandarden" för klinisk forskning sekvensering . Nyare NGS -teknik blir dock också vanligt i kliniska forskningslaboratorier på grund av deras högre kapacitet och lägre kostnader per prov.

Rekommenderad: