Innehållsförteckning:

Hur sätter man in en gen i en plasmid?
Hur sätter man in en gen i en plasmid?

Video: Hur sätter man in en gen i en plasmid?

Video: Hur sätter man in en gen i en plasmid?
Video: AP Biology: рестрикционные ферменты переваривают циркулярные плазмиды 2024, November
Anonim

De grundläggande stegen är:

  1. Skär upp plasmid och "klistra in" i gen . Denna process bygger på restriktionsenzymer (som skär DNA) och DNA-ligas (som förenar DNA).
  2. Föra in de plasmid in bakterie.
  3. Väx upp massor av plasmid -bära bakterier och använda dem som "fabriker" för att göra proteinet.

Dessutom, hur kan en gen infogas i en plasmid GCSE?

det är insatt i en plasmid med användning av ligasenzymer. de plasmid går in i en bakteriecell. den transgena bakterien reproducerar sig, vilket resulterar i miljontals identiska bakterier som producerar humant insulin.

Dessutom, hur subklonar man en gen? Grundläggande steg för Subkloning Du släpper och renar din insats från modervektorn, ligerar denna insättning till en förberedd destinationsvektor, omvandlar denna ligeringsreaktion till kompetenta bakterieceller. Sedan screenar du de transformerade cellerna för insättningen.

Med tanke på detta, vilka är de fyra stegen för genkloning?

I de klassiska restriktionsenzymdigestions- och ligeringskloningsprotokollen, involverar kloning av alla DNA-fragment i huvudsak fyra steg:

  • isolering av DNA av intresse (eller mål-DNA),
  • ligering,
  • transfektion (eller transformation), och.
  • en screening/urvalsprocedur.

Hur amplifierar man en plasmid?

Experimentell procedur

  1. Kör PCR och rena PCR-produkten: Kör PCR för att amplifiera ditt insatta DNA.
  2. Smälta ditt DNA:
  3. Isolera din insats och vektor genom gelrening:
  4. Ligera din insats i din vektor:
  5. Omvandling:
  6. Isolera den färdiga plasmiden:
  7. Verifiera din plasmid genom att sekvensera:

Rekommenderad: