Hur fungerar Gibson-kloning?
Hur fungerar Gibson-kloning?

Video: Hur fungerar Gibson-kloning?

Video: Hur fungerar Gibson-kloning?
Video: Introduction to Gibson Assembly® 2024, November
Anonim

De Gibson kloning Master Mix består av tre olika enzymer i en enda buffert. Varje enzym har en specifik och unik funktion för reaktionen: T5 Exonukleas - skapar enkelsträngat DNA 3'-överhäng genom att tugga tillbaka från DNA 5'-änden. Komplementära DNA-fragment kan därefter hybridisera till varandra.

Med tanke på detta, hur fungerar Gibson?

De Gibson Assembly®-metoden är en kloningsprocedur som tillåter kloning av två eller flera fragment utan behov av restriktionsenzymspjälkning eller kompatibla restriktionsställen. Istället är användardefinierade överlappande ändar inkorporerade i fragmenten för att möjliggöra sömlös sammanfogning av intilliggande fragment.

På samma sätt, vad finns i Gibson Assembly Master Mix? De Gibson Cloning Master Mix består av tre olika enzymer i en enda buffert. Varje enzym har en specifik och unik funktion för reaktionen: T5 Exonukleas - skapar enkelsträngat DNA 3'-överhäng genom att tugga tillbaka från DNA 5'-änden. Komplementära DNA-fragment kan därefter hybridisera till varandra.

På detta sätt, hur fungerar Golden Gate-montering?

Golden Gate kloning eller Golden Gate montering är en molekylär kloningsmetod som tillåter en forskare att samtidigt och riktat sätta ihop flera DNA-fragment till ett enda stycke med hjälp av restriktionsenzymer av typ II och T4 DNA-ligas. Detta montering är utförs in vitro.

Hur fungerar Gateway-kloning?

De GATEWAY Kloning Tekniken är baserad på det platsspecifika rekombinationssystem som används av fag l för att integrera dess DNA i E. AttL- och attR-ställena som omger det insatta fag-DNA:t rekombinerar platsspecifikt under excisionshändelsen för att reformera attP-stället i fag l och attB-plats i E.

Rekommenderad: